琼斯博士和他的父亲联手出击，一起追寻传说中极具神力的基督圣杯的下落，这是耶稣最后晚餐时使用过的圣杯。在意大利一所古教堂里，他们找到了线索。但发现纳粹党也在找圣杯。纳粹再次加入抢夺宝藏的行列，企图阻挠琼斯父子的计划。为找回圣杯以及被纳粹掳走的父亲，琼斯不惜一切，任凭处处险象环生，千方百计与纳粹党对抗到底。最终双方均空手而归。